Veel gestelde vragen

De inscriptie 0,17 verwijst naar de dikte, in millimeters, van het dekglas dat door de lensontwerper werd aangenomen bij het berekenen van de correcties voor het objectief. Voor objectieven met een numerieke apertuur (N.A.) groter dan 0,45 kan een afwijking in deze veronderstelde dikte (of helemaal geen dekglas) leiden tot verslechtering van het beeld.

Dit getal is de numerieke apertuur (N.A.) van het objectief, een maat voor de lichtopvangcapaciteit van het objectief. Hoe hoger de numerieke apertuur, terwijl andere zaken gelijk blijven, hoe beter het objectief in staat is om de details van het monster te scheiden bij het vormen van een afbeelding; ook hoe helderder het beeld. Hogere N.A.-objectieven zijn meestal duurder. Hoe hoger de numerieke apertuur van het objectief, hoe kleiner de scherptediepte (zie definitie van scherptediepte).

Dit nummer identificeert een objectief met een eindige buislengte. 160 millimeter is de afstand van de opening van de revolver (waar het objectief in wordt geschroefd) tot de bovenkant van de tubus (waar het oculair wordt ingebracht). Als deze afstand wordt verlengd, b.v. door het inbrengen van accessoires in de lichtweg boven de revolver zal sferische aberratie het gevolg zijn, tenzij optisch gecorrigeerde lenzen in het accessoire zijn opgenomen.

Deze inscriptie identificeert het objectief als een oneindig gecorrigeerd objectief. Lichtstralen die uit zo’n objectief komen, worden in parallelle bundels naar het oneindige geprojecteerd. Een dergelijk objectief, met zijn vele voordelen, vereist een buislens in de lichtweg om de evenwijdige stralen te convergeren zodat ze in het vlak van het oculairdiafragma komen te focussen.

Plan duidt een objectief aan dat op het diafragmavlak van het oculair een beeld projecteert dat van rand tot rand van het gezichtsveld vlak is. Sommige objectieven, b.v. de huidige planapochromaten en huidige planfluorieten zullen zelfs met oculairs met veldnummers (F.N. zie hieronder) tot 26.5 vlakke beelden geven; anderen tot F.N. 22.

De term Planapo betekent een planapochromat, een objectief met de hoogste correctie, gecorrigeerd voor vier kleuren chromatisch en sferisch. Een dergelijk objectief zal vanwege zijn vergroting een grotere numerieke apertuur hebben dan objectieven met een geringere correctie. Planapochromaten zijn de beste objectieven voor kritische resolutie en kleurenfotomicrografie. Als andere dingen gelijk zijn, hebben ze meestal een kleinere scherptediepte. Ze zijn ook duurder.

PlanFl duidt een objectief aan dat een planfluoriet is, ook wel een plan-semi-apochromat genoemd. (Sommige fabrikanten noemen dergelijke objectieven Fluars of Neofluars) Deze objectieven zijn ook gecorrigeerd voor vier golflengten, maar niet zo volledig als planapochromaten. Planfluorieten zijn ook zeer geschikt voor kleurenfotomicrografie en zijn minder duur dan planapochromaten.

Dergelijke objectieven zijn achromaten of planachromaten. Ze zijn nu gecorrigeerd voor drie golflengten chromatisch en een of twee golflengten sferisch. Ze geven hun beste beelden in groen licht. In wit licht zullen de planachromaten echter bevredigende beelden opleveren voor kleurenfotomicrografie, maar niet zo goed als objectieven voor betere correctie.

De 4x of 5x heeft een rode ring; de 10x geel; de 20x groen; de 40x of 50x of 60x blauw; de 100x wit. Deze ringen maken het gemakkelijker om de vergroting van het objectief visueel te identificeren; de kleuren zijn standaard voor de meeste fabrikanten. Bovendien worden Olympus-faseobjectieven verder geïdentificeerd door een rode ring dichter bij de voorlens van het objectief (LB-serie) of alle inscripties in groen voor de oneindige reeks faseobjectieven.

Een dergelijk objectief is ontworpen om naar een monster te kijken dat niet is afgedekt door een dekglas; bijv. een uitstrijkje. Bij numerieke openingen boven 0,45 zal een dergelijk objectief beelden opleveren die vrij zijn van sferische aberratie wanneer uitstrijkjes of andere preparaten zonderdekglas worden onderzocht. Metallurgische objectieven zijn bijna altijd ontworpen om naar onbedekte objecten te kijken; bijv. gepolijste metalen, wafels, enz.

De letters geven een objectief voor lange werk- of ultra-lange werkafstand aan. De verticale afstand van de voorlens van het objectief tot het gefocusseerde exemplaar (werkafstand) is veel langer dan die voor een standaard objectief met vergelijkbare vergroting. Dergelijke objectieven zijn van onschatbare waarde voor het opzoeken door een kweekkamer of petrischaal in omgekeerde biologische microscopie; of het onderzoeken van IC-wafers om onbedoeld contact met de wafel te voorkomen; of het inspecteren van soldeerverbindingen van gemonteerde chips.

Dit duidt een objectief aan dat de voorkeur heeft voor gebruik in Nomarski (NIC) of differentiële interferentiemicroscopie (DIC).

Een dergelijk objectief is een immersieobjectief, waarbij een druppel immersieolie (of water) nodig is tussen de frontlens van het objectief en het dekglas van een preparaat. Wordt een medium niet gebruikt bij dergelijk objectief, zal het beeld zeer slecht zijn. Sommige fabrikanten schrijven een zwarte ring op het onderste deel van de mantel om de gebruiker in staat te stellen onmiddellijk de noodzaak van oliecontact te herkennen. Evenzo verwijzen de letters WI naar een objectief dat water nodig heeft, in plaats van olie, als medium. Om een ​​numerieke apertuur van 1,0 of hoger te bereiken, is een immersieobjectief vereist. WI-objectieven zijn vooral nuttig bij het observeren van levende biologische exemplaren.

Gewoon glas is relatief ondoorzichtig voor golflengten van ultraviolet licht van minder dan 400 nanometer. UV-objectieven bevatten speciaal samengestelde glaselementen en coatings om een ​​relatief hoog percentage licht van dergelijke golflengten door te laten. Deze objectieven zijn zeer nuttig voor bijna-ultraviolette excitatie bij fluorescentiewerk met gereflecteerd licht. De nieuwe Olympus oneindig-gecorrigeerde U-planapochromaten en U-planfluorieten hebben zo’n verbeterde transmissie in het nabije ultraviolet.

De letters PL staan ​​voor positive low, een fasecontrast waarbij het preparaat donkerder lijkt dan de achtergrond van het gezichtsveld. Minder vaak gebruikt, staat de letter NH voor negative high, een soort fasecontrast waarbij het preparaat lichter lijkt dan de achtergrond.

Deze letters duiden het objectief aan als relatief spanningsvrij (dat wil zeggen, het objectief zelf heeft weinig of geen effect op gepolariseerd licht). Dergelijke objectieven zijn vereist voor kwalitatief en/of kwantitatief onderzoek van gepolariseerd licht van hoge kwaliteit.

Deze aanduiding is het veldnummer van het oculair. Hoe hoger het veldnummer van het oculair dat wordt gebruikt met een bepaald objectief, hoe meer preparaatgebied er in het gezichtsveld zal verschijnen. De diameter van het gezichtsveld, in millimeters, wordt berekend door het veldnummer van het oculair te delen door de vergroting van het objectief. (Bij een 10x objectief en een oculair met een veldgetal van 22 zou de diameter van het gezichtsveld bijvoorbeeld 2,2 millimeter zijn) Voor veel microscopisten, b.v. hematologen, bespaart het tijd om meer van het monster op een bepaald moment te kunnen zien. Oculairs met een veldgetal van 26,5 worden superbrede oculairs genoemd.

C of K identificeren een compenserend oculair. Sommige microscoopobjectieven bevatten geen correctie voor laterale chromatische aberratie. Voor dergelijke objectieven (Olympus LB-serie) voltooit het compenserende oculair de correctie. WF betekent widefield. Hiermee is meer van het monster te zien op een bepaald moment. H staat voor high eyepoint, wat betekent dat de ogen van de gebruiker tijdens observatie niet heel dicht bij de bovenste lens van het oculair hoeven te worden geplaatst; erg prettig voor brildragers.

De inkeping is bedoeld voor plaatsing van de uitstekende “locator”-pin op oculairs waarop een kruisdraad is geïnstalleerd. Een dergelijk oculair kan worden scherpgesteld door de bovenste lens van de dioptrie te draaien, terwijl de “locator”-pin het richtkruis (bijv. dkruisdraad of micrometerschaal) goed georiënteerd houdt.

Deze zijn meestal 25 millimeter of 30 millimeter (zoals op de nieuwste Olympus BX-microscopen en op alle Olympus superbrede tubussen.

Dit is een oculair bedoeld voor fotomicrografie, niet voor observatie. Het oculair “pakt” het door het objectief geprojecteerde beeld op en projecteert dat beeld op het filmvlak in een camera. Foto-oculairs (ook wel projectielenzen genoemd) hebben meestal een laag vergrotingsvermogen omdat de beelden die ze op film projecteren vervolgens vaak verder worden vergroot (om de kans op “lege” vergroting te verkleinen). Tegenwoordig worden deze oculairs, door de veranderde techniek, niet meer gebruikt.

Wanneer de correctiering wordt gedraaid, scheidt of brengt hij enkele van de interne glaselementen van het objectief samen. Deze actie kan een onjuiste dekglasdikte corrigeren. In rechtopstaande microscopen is de dekglascorrectie meestal 0,11-0,22 millimeter. Voor omgekeerde microscopen is het correctiebereik van 0 (onbedekt) tot 2 millimeter om te corrigeren voor dikke kweekschalen. Het doel is om sferische aberratie te elimineren.

Dit is de verticale afstand in millimeters, of een decimale fractie van een millimeter, van de voorkant van het objectief tot het dekglas of het onbedekte preparaat, wanneer het preparaat in focus is. Objectieven met een hoge vergroting hebben gewoonlijk zeer korte werkafstanden. De fabrikant zou u voor elk objectief gegevens over de werkafstand moeten kunnen verstrekken.

Bij de meeste moderne microscopen is deze afstand (45 millimeter) de gekozen afstand van de opening van de revolver tot het gefocusseerde preparaat. Door een standaardafstand voor alle objectieven te hebben, is het gemakkelijk om elk objectief op zijn beurt in de lichtweg te draaien met een minimum aan herfocussering. Een dergelijke batterij van objectieven, ondanks verschillende lengtes van de objectieven zelf, wordt beschreven als parfocaal. Als bovendien een gericht kenmerk dat is gecentreerd in het gezichtsveld gecentreerd blijft terwijl de objectieven worden gewijzigd, worden de objectieven beschreven als parcentrisch.

Het oplossend vermogen van een objectief verwijst naar het vermogen van dat objectief om een ​​beeld op te leveren dat duidelijk de punten of lijnen scheidt die dicht bij elkaar liggen in het monster. Hoe korter de afstand (tussen punt of lijnen), hoe beter het oplossend vermogen van het objectief. Het oplossend vermogen is gerelateerd aan de numerieke apertuur van het objectief; hoe hoger de numerieke apertuur, hoe beter het oplossend vermogen. De formule wordt uitgedrukt als:

d = / 2 NA

of

d = 0,61 / NA

Het eerste is volgens Abbe, het laatste volgens Rayleigh. In de formule is d de afstand tussen twee dicht bij elkaar liggende punten; λ is de golflengte van het licht dat wordt gebruikt; N.A. is numerieke apertuur. Resolutie is de werkelijke scheiding die wordt bereikt door het microscoopsysteem. Bij Köhler-verlichting wordt het condensordiafragma bijvoorbeeld meestal enigszins gesloten om een ​​compromis te bereiken tussen oplossend vermogen en contrast – om de zichtbaarheid te verbeteren.

De hoogste N.A. voor een “droog” objectief is 0,95. Als zo’n objectief bedoeld is om door een dekglas te kijken, moet het een correctiering hebben. Als een dergelijk objectief is ontworpen voor onbedekte preparaten, b.v. uitstrijkjes of metallurgisch, er is geen dekglascorrectie nodig.

Als andere zaken gelijk zijn, varieert de helderheid van een afbeelding direct als het kwadraat van de N.A.; als de vierde macht in gereflecteerd licht fluorescentie. Een hogere N.A. levert dus helderdere beelden op. Omgekeerd varieert de helderheid inverse als het kwadraat van de vergroting. Dus, als andere zaken gelijk blijven, zal een hogere vergroting de helderheid van het beeld verminderen.

Nee, omdat het eindige systeem geen buislens bevat om de parallelle stralen scherp te stellen.

Hoewel je het objectief misschien in de revolver kunt schroeven, zal de aanwezigheid van een buislens in het lichtpad resulteren in een verslechterd beeld.

Nee, dat zou niet wenselijk zijn. De brandpuntsafstand van Olympus’ buislens (180mm) is niet hetzelfde als die van andere fabrikanten. Als gevolg hiervan zou de vergroting van het objectief niet nauwkeurig zijn. Ook zouden aberraties worden geïntroduceerd omdat andere fabrikanten laterale chromatische aberratie in de buislens corrigeren; de nieuwe Olympus objectieven voor de BX-serie bereiken deze correctie in de objectieven zelf. Ook zou het objectief waarschijnlijk niet parfocaal zijn met Olympus-objectieven.

Ja. Voor bedekte of onbedekte preparaten zouden metallurgische objectieven van N.A. 0,40 of minder bevredigende beelden moeten geven. Voor een N.A. boven 0,40 mag het preparaat niet worden afgedekt door een dekglas, aangezien de metallurgische objectieven worden gecorrigeerd voor onbedekte monsters. De werkafstand kan erg kort zijn en de parfocaliteit met biologische objectieven is mogelijk niet zo nauwkeurig.

Het antwoord is een voorlopig ja. Planachromaten kunnen bevredigend dienen voor blauwe of groene excitatiegolflengten. De glaselementen van de planachromat kunnen echter zelf fluoresceren bij excitatie in het nabije ultraviolet. Ook hebben planachromaten, voor hun respectievelijke vergrotingen, lagere N.A.’s dan planfluorieten of planapochromaten, waardoor de beelden mogelijk niet zo helder zijn.

Ja. De fasecontrastcondensor moet naar de O-positie worden verplaatst en de standaard Köhler-verlichtingsprocedure moet worden toegepast. De helderveldbeelden zullen bijna net zo goed zijn als wanneer een normaal helderveldobjectief zou worden gebruikt.

Dergelijke microscopen kunnen goed functioneren met gewone achromaten of planachromaten. Voor onderzoek of voor de beste kleurenfotomicrografie hebben planfluorieten of planapochromaten de voorkeur (en duurder).